一、降世
公元1822年12月27日，巴斯德诞生在法国东部裘拉（Jura）省的洛尔镇（Dole），镇中有一条清澈的溪流，巴斯德的家就在溪边的小路旁。父亲是拿破仑军骑兵队的一名退伍军人，退伍后当鞣革工人，母亲是农家女，他有一个姊姊和两个妹妹。四岁那年，全家迁往阿尔布瓦（Arbois）。法国的中学通常是7年制，最后一学年分为哲学科和数学科。巴斯德在阿尔布瓦中学读6年，第7年转入布山松中学理科。中学时，他在学校表现普通，但很爱问问题，凡事追根究底，甚至因此成为某些老师的眼中钉。就这样不断地发问、学习，对化学、物理和艺术都有深厚兴趣的巴斯德渐渐变成优秀的学生。
二、大学
1840年8月，路易斯·巴斯德中学毕业，同年10月，他被聘为布山松中学的助教。在这段时间里，他一边任教，一边准备大学入学考试。当时，法国有两所着名学府——巴黎高等师范学院（Ecole Normale Superieure，ENS）和高等理工科学校（école Polytechnique）。这两所学校在科学教育领域享有盛誉，吸引了众多优秀学子。
1843年8月，巴斯德成功考入巴黎高等师范学院，攻读化学和物理的教学法。在巴黎高等师范学院，巴斯德表现出色，不仅在课堂上认真学习，还经常在实验室里进行实验，验证课堂上学到的知识。他几乎每天都在实验室度过，因此被同学们戏称为“实验室的蛀虫”。这种勤奋和执着的态度为他日后的科学研究打下了坚实的基础。
1846年，23岁的巴斯德从巴黎高等师范学院毕业，并顺利通过了物理教授资格考试。考官对他的评价极高，认为他是这一届毕业生中唯一具备教育才华的学生。不久后，巴斯德收到了图尔农中学（le Lycée de Tournon）的物理教师聘书。然而，巴斯德内心深处渴望在巴黎继续从事科学研究，不愿意离开这座充满科学氛围的城市。因此，他决定尽可能拖延赴职时间，希望能够找到在巴黎继续深造的机会。
为了实现这一目标，巴斯德写信给巴黎中央理工学院（l’école centrale）的创办人之一杜玛（Jean-Baptiste Dumas），寻求在巴黎任教的机会。尽管杜玛未能直接帮助巴斯德，但这件事被另一位着名化学家巴莱（Antoine Jér?me Balard）得知。巴莱年轻时因发现溴元素而声名远播，他决定帮助巴斯德留在巴黎。在巴莱的帮助下，巴斯德得以进入巴莱的实验室，成为一名助手，同时也成为博士班研究生。
三、酒石酸
1848年，路易斯·巴斯德在巴莱的实验室中逐渐确认了自己的志向——成为一名化学家。当时，晶体研究正蓬勃发展，巴斯德对此产生了浓厚的兴趣，认为这是一个“有用的科学”领域。作为一个喜欢酒的人，巴斯德注意到在制酒过程中，酒石酸的晶体会在发酵桶中沉积。这一现象激发了他的好奇心，他决定选择酒石酸盐作为研究课题。
在发酵桶中沉积的不仅是酒石酸，还有一种被称为“类酒石酸”的物质。尽管这两种物质的分子式相同，但它们的光学特性却大相径庭。酒石酸溶液在偏振光下会产生右旋光，而类酒石酸溶液则没有任何光学活性。这一现象引起了巴斯德的极大兴趣，他相信其中一定有被其他化学家忽略的地方。
巴斯德决定运用自己在化学和物理方面的知识来解决这个问题。他首先假设这两种物质的晶体结构可能存在差异。于是，他用镊子仔细挑出酒石酸盐的结晶，仔细观察。他发现，酒石酸盐的结晶有一面较长，不是完全对称的，这可能是导致其产生右旋光的原因。
接下来，巴斯德假设类酒石酸盐的结晶应该是对称的，因此通过类酒石酸溶液的偏振光不会发生改变。然而，当他将类酒石酸盐的结晶挑出来观察时，却惊讶地发现这些结晶同样有一个较长的、不对称的晶面。这一发现让他再次陷入了困惑：为什么两种晶体都有不对称的晶面，但只有酒石酸盐具有光学活性？
巴斯德没有放弃，他大胆地假设：类酒石酸盐的结晶中，某些晶体较长的晶面在左边，而另一些晶体较长的晶面在右边。这一假设意味着类酒石酸盐的结晶实际上是两种不同形式的混合物，一种具有左旋特性，另一种具有右旋特性，这两种特性互相抵消，因此类酒石酸溶液没有光学活性。
为了验证这一假设，巴斯德重新检视类酒石酸盐的结晶。他发现确实存在两种类型的晶体，一种较长的晶面在左边，另一种较长的晶面在右边。他将所有较长的晶面在左边的晶体挑出，溶解后通过偏振光，结果产生了左旋现象；而将所有较长的晶面在右边的晶体挑出，溶解后通过偏振光，则产生了右旋现象。这一发现证明了他的假设是正确的：类酒石酸溶液不具有光学活性，是因为它是两种晶体的混合物，它们的光学特性互相抵消。
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